2011年, 第33卷, 第6期　刊出日期：2011-12-20

  

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病例报告
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  过氧化物酶体增殖物激活受体γ Pro12Ala:老问题,新问题

  方福德

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 591-592. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.001

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  本文就不同人群过氧化物酶体增殖物激活受体γPro12Ala多态性与2型糖尿病发病风险和易感性的相关性的Meta分析结果进行了评述，并就中国疾病遗传分析研究工作中所存在的相关问题作了点评，提出了相关的建议。
论著
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  中国汉族人群过氧化物酶体增殖物激活受体γ基因Pro12Ala多态性与2型糖尿病相关性的Meta分析

  郭乌兰,唐勇,韩学尧,纪立农

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 593-599. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.002

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  目的评价中国汉族人群过氧化物酶体增殖物激活受体γ（ PPARγ）基因多态性Pro12Ala与2型糖尿病的相关性。 方法 以“PPARγ”、“pparg”、“Pro12Ala”、“type 2 diabetes”、“Chinese”、“过氧化物酶增殖剂激活受体”、“2型糖尿病”为检索词，全面检索2型糖尿病与Pro12Ala相关的文献，用stata 11.0 进行Meta 分析，对研究数据的优势比（OR）值进行合并，并评价分析结果的可靠性和稳定性。 结果 （1）检索到22篇，其中17篇符合纳入标准，包含了3927例2型糖尿患者和3364例正常对照，共7921名。纳入研究人群同质性较好，无显著发表偏倚。（2）次要等位基因Ala12在正常人和2型糖尿病患者中的频率分别为4.8%与4.6%。在显性和加性遗传模式下，次要等位基因携带者相对于未携带者的OR值分别为0.95(95% CI:0.80,1.12)和0.93(95% CI:0.79,1.09)。 结论 中国汉族人群 PPARγ基因多态性Pro12Ala与2型糖尿病无相关性。
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  激活瞬时受体电位香草醛亚家族1抑制RhoA/Rho激酶改善高脂介导的血管舒张功能异常

  朱振宇,张莉莉,王沛坚,马丽群,王利娟,刘道燕,祝之明

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 600-605. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.003

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  目的探讨膳食辣椒素通过激活瞬时受体电位香草醛亚家族1（TRPV1）对高脂饮食介导的血管功能障碍的作用及机制。 方法 10周龄雄性C57BL/6J小鼠，分别给予普通饮食（普通饲料）、普通饮食+辣椒素（普食+0.01%辣椒素）、高脂饮食（高脂饲料）、高脂饮食+辣椒素（高脂饲料+0.01%辣椒素）干预，20周后观察鼠尾血压、离体主动脉环血管收缩和舒张功能、血管电压依赖型钾通道Kv1.4和RhoA/Rho激酶蛋白表达。 结果 高脂饮食组内皮依赖和非内皮依赖的舒张反应分别为（26±12）%和（18.9±13.0）%，均明显低于普通饮食组的100%和100%（P均<0.01）。高脂饮食+辣椒素组的内皮依赖和非内皮依赖的舒张反应分别为（69±15）%和(46.5±6.0)%，均明显高于高脂饮食组（P均<0.05），但仍明显低于普通饮食组（P<0.05，P<0.01）。高脂饮食组大鼠的血压明显高于普通饮食组[(135±7)mmHg比(116±5)mmHg, P<0.01］。Western blot检测结果显示，普通饮食+辣椒素组大鼠的Kv1.4蛋白表达明显高于普通饮食组（P<0.05），高脂饮食+辣椒素组大鼠的Kv1.4蛋白表达明显高于高脂饮食组（P<0.05）；高脂饮食组大鼠RhoA/Rho激酶蛋白的表达明显高于普通饮食组（P<0.05），普通饮食+辣椒素组明显低于普通饮食组（P<0.05），高脂饮食+辣椒素组明显低于高脂饮食组（P<0.05）。 结论 膳食辣椒素能够改善高脂介导的血管舒张功能异常，可能与其激活TRPV1通道，从而上调钾通道和抑制RhoA/Rho激酶信号通路相关。
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  表皮生长因子影响人羊膜间充质干细胞迁移的机制

  李彩虹,施萍,庞希宁

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 606-610. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.004

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  目的研究表皮生长因子（EGF）影响体外培养的人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）迁移的机制。 方法 将体外培养的hAMSCs分为对照组（未处理）、EGF组、抑制剂AG1478+EGF组、抑制剂LY294002+EGF组和抑制剂U0126+EGF组5组，采用Transwell小室测定各组hAMSCs的迁移能力，Western blot检测各组磷酸化EGFR（P-EGFR）、磷酸化AKT（P-AKT）和磷酸化ERK1/2（P-ERK1/2）及金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9的表达情况，RNA-Seq 技术对EGF组和对照组细胞中差异表达基因进行分析。 结果 EGF组细胞的迁移能力明显高于对照组（P=0.0361），抑制剂AG1478+EGF组（P=0.0113）、抑制剂LY294002+EGF组（P=0.0169）和抑制剂U0126+EGF组（P=0.0293）明显低于EGF组。EGF可增加hAMSCs的P-EGFR、P-AKT和P-ERK1/2及MMP-2的表达，但P-AKT和P-ERK表达的增加可被AG1478和LY294002 抑制。对EGF组和对照组细胞中差异表达基因的 GO 功能富集分析和 KEGG代谢途径分析结果表明，EGF组细胞中发生转录上调的基因主要参与转录调节、蛋白质修饰、凋亡抑制等生命过程，其中与MAPK信号通路有关的基因为DUSP5、IL1B、DUSP6、NGF和HSPA2。 结论 EGF引起的hAMSCs迁移可能是通过PI3K/AKT、ERK信号通路介导的，需要MMP-2的表达，及其参与转录调节、蛋白质修饰和凋亡抑制等基因的协同表达。
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  人羊膜负载人羊膜间充质干细胞对SD大鼠皮肤创面愈合的影响

  霍双枝,施萍,庞希宁

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 611-614. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.005

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  目的观察人羊膜（HAM）负载人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）对SD大鼠皮肤创面愈合的影响。 方法 采用胰酶消化HAM的上皮细胞，将hAMSCs接种于HAM上培养，然后贴覆于大鼠创面，观察创面大体变化，采用HE染色和免疫组织化学染色法检测创面愈合情况，并与单纯羊膜组和对照组进行比较。 结果 HAM负载hAMSCs组大鼠创面的平均愈合时间为(18.3±0.9)d，明显快于对照组的（26.4±0.7）d（P<0.01）和单纯羊膜组的（21.5±1.2）d（P<0.05）；术后11 d和14 d，HAM负载hAMSCs组大鼠的创面愈合率分别为(81.5±7.2)%和(94.3±3.6)%，明显高于对照组的(48.5±3.2)%和(74.3±4.3)%及单纯羊膜组的(68.5±4.5)%和(86.8±4.8)%（P均<0.01）。皮肤切片HE染色结果证实，HAM负载hAMSCs组大鼠的伤口愈合质量明显优于单纯羊膜组和对照组。免疫组织化学染色结果显示，术后14 d， HAM负载hAMSCs组大鼠皮肤CK19阳性表皮干细胞数为48.2±3.2，明显高于单纯羊膜组的37.7±3.1（P<0.05）和对照组的29.6±2.4（P<0.01）；血管内皮生长因子阳性颗粒表达数为64.5±4.5，也明显高于单纯羊膜组的52.6±3.8（P<0.05）和对照组的40.7±3.1（P<0.01）。 结论 HAM负载hAMSCs可能是通过促进表皮干细胞和毛细血管再生，促进皮肤损伤修复。
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  细胞外信号激酶蛋白5在卵泡刺激素介导的卵泡颗粒细胞甾体激素生成中的作用

  高小博,姚楠,马旭,陆彩玲,杨伯清, 彭小忠

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 615-619. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.006

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  目的研究细胞外信号激酶蛋白5(ERK5)在卵巢颗粒细胞甾体激素生成中的作用。 方法 采用Western blot检测在卵泡刺激素（FSH）刺激原代颗粒细胞甾体激素生成过程中ERK5的表达变化和激活情况，荧光共聚焦技术分析ERK5的亚细胞定位，腺病毒技术观察活化型ERK5和显性负性ERK5对颗粒细胞甾体激素生成的影响。 结果 Western blot检测结果表明，FSH处理颗粒细胞后ERK5的表达随处理时间延长而下调，而ERK5活性形式的表达随处理时间延长而逐渐上升。荧光共聚焦技术分析结果显示，FSH的处理并没有明显影响ERK5在颗粒细胞中的定位。腺病毒技术观察结果发现，在细胞中联合感染活化型MEK5重组腺病毒和野生型ERK5重组腺病毒能促进FSH引起的细胞内StAR的表达升高和孕酮分泌，而显性负性ERK5重组腺病毒感染细胞则出现相反的效应。 结论 ERK5可能促进了FSH介导的颗粒细胞甾体激素生成。
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  小鼠大脑皮层层次特异表达基因天然反义转录物的筛选与鉴定

  李萍,张靖,李爱花,王珊,谈小超,阴彬,彭小忠

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 620-623. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.007

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  目的筛选并鉴定小鼠大脑皮层发育过程中皮层层次特异表达的基因是否存在天然反义转录物（NAT）。 方法 对63个小鼠大脑皮层层次特异表达的基因进行生物信息学预测，筛选出31个可能存在NAT的基因，从小鼠脑组织及神经系统来源的细胞系提取总RNA，采用RT-PCR方法对筛选阳性基因进行鉴定并克隆到pGEM-T载体中进行测序。 结果 31个经生物信息学预测的基因中，8个为NAT阳性。 结论 小鼠大脑皮层发育过程中皮层层次特异表达的基因存在NAT，NAT可能通过调控编码基因影响小鼠皮层发育。
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  非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白C' 末端SBP3×Flag标记的HCT 116结直肠癌细胞模型的建立

  黄泽彬,张泽延,张晓东,缪时英,王琳芳,杜润蕾

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 624-628. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.008

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  目的建立非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白（TPX2） C' 末端SBP-3×Flag标记的HCT-116结直肠癌细胞模型。 方法 PCR扩增同源臂，构建TPX2的腺相关病毒打靶载体，包装病毒后打靶HCT-116结直肠癌细胞，G418和PCR筛选获得含有新霉素抗性基因的阳性细胞株，最后通过Cre病毒感染去除抗性基因，并用PCR方法筛选获得TPX2 C' 末端SBP和3×Flag内源性双标签的HCT-116结直肠癌细胞株。 结果 筛选获得2个含有新霉素抗性基因的细胞株，随后经Cre病毒感染得到去除新霉素抗性基因的阳性细胞克隆，并经Western blot检测验证了SBP-3×Flag基因的敲入。 结论 成功建立了TPX2 C' 末端SBP-3×Flag标记的HCT-116结直肠癌细胞模型。
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  小鼠睾丸曲细精管生精上皮的分离及形态观察

  付俊,缪时英

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 629-631. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.009

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  目的寻找一种简单可行的研究精子发生过程中蛋白质定位的方法。 方法 将新鲜的小鼠睾丸去除白膜，通过胶原酶Ⅰ及DNA酶Ⅰ的作用分离各种细胞。细胞经简单处理后以合适的浓度铺片，进行荧光染色，并于共聚焦荧光显微镜下观察。 结果 通过分析特异的染料对顶体和细胞核染色的结果，可以分辨出各个阶段的生精细胞。 结论 建立了一种研究精子发生过程中蛋白质定位的简单、可靠的方法。
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  蛋白激酶Nemo样激酶基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

  程筱雯,梁俊波,缪时英,王琳芳

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 632-637. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.010

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  目的构建含有蛋白激酶Nemo样激酶（NLK）的重组腺病毒载体。 方法 采用RT-PCR方法在人胚肾细胞系HEK293T细胞中扩增NLK基因及其突变体K155M、T286V和C425Y，同时在目的基因的C端添加便于蛋白表达检测的FLAG tag，经与载体pAdTrack-CMV连接、转化、筛选、鉴定后，将Western blot检测表达正确的重组过渡质粒pAdTrack-CMV-NLK及其突变体再经酶切、电转入BJ5183感受态细胞（已包含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1）同源重组，并筛选、鉴定、扩增。通过PacI酶切后，以快速简便的乙醇沉淀法替代传统的酚-氯仿-异戊醇法回收酶切产物，用高效低毒高稳定性的FuGENE HD转染试剂替代传统的lipofectamin 2000转染低代数的HEK293A包装细胞，进行病毒包装。包装后的重组腺病毒感染结直肠癌细胞HCT-116，Western blot检测以确认NLK及其突变体蛋白的表达。 结果 经PCR、测序及Western blot检测证实，成功构建了携带NLK基因及其突变体的腺病毒载体，PCR及限制性内切酶酶切鉴定重组过渡质粒pAdTrack-CMV-NLK及其突变体与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组成功，重组表达克隆转染HEK293A细胞获得病毒原液，扩增后感染结直肠癌细胞HCT-116能正确表达NLK蛋白及其突变体蛋白。 结论 成功制备NLK基因及其突变体重组腺病毒，可进一步用于NLK生理功能的研究。
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  线粒体转录复合物相关蛋白原核表达与纯化

  刘光,杨瑞锋,石秉炀,刘德培

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 638-643. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.011

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  目的获取人线粒体转录因子A（TFAM）、线粒体转录因子B1（TFB1M）、线粒体转录因子B2（TFB2M）基因片段，高效表达和纯化带有谷胱甘肽转移酶（GST）标签的 GST-TFAM、GST-TFB1M、GST-TFB2M融合蛋白。 方法 设计引物扩增得到TFAM、TFB1M、TFB2M的cDNA片段，通过引入的酶切位点克隆至表达载体pET42a，构建重组表达载体，并导入E.coli BL21宿主菌中，异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组的GST融合蛋白，谷胱甘肽琼脂糖珠纯化表达产物，十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行分析鉴定。 结果 获得pET42a-TFAM、pET42a-TFB1M、pET42a-TFB2M表达质粒，测序结果与GenBank的基因序列一致。SDS-PAGE分析结果显示，重组GST-TFAM、GST-TFB1M、GST-TFB2M融合蛋白分别在相对分子质量56 000、67 000、 69-000处出现特异性蛋白条带，经GST亲和层析纯化后，得到高纯度的融合蛋白。 结论 成功构建了基因重组体pET42a-TFAM、pET42a- TFB1M、pET42a-TFB2M，制备了GST-TFAM、GST-TFB1M、GST-TFB2M融合蛋白。
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  大量制备过继免疫治疗用γδT细胞时培养基的选择

  周建华,康宁,崔莲仙,何维

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 644-648. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.012

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  目的选择适于过继免疫治疗用γδT细胞大量制备的培养基。 方法 采用不同培养基（RPMI-1640、AIM-V和OpTmizer，分别添加或者不添加自体血清）对γδT细胞进行培养，比较细胞存活率、纯度、扩增效率和生物学功能。 结果 仅未添加血清的RPMI-1640培养基扩增的细胞存活率随培养时间增加略有下降。不论添加血清与否，AIM-V和OpTmizer培养基扩增的细胞纯度都始终高于RPMI-1640。第2周时，未添加血清的OpTmizer培养基扩增的细胞纯度和扩增效率都显著高于RPMI-1640培养基和AIM-V培养基（P均0.05），但RPMI-1640培养的细胞对Daudi细胞的杀伤效率显著低于OpTmizer和AIM-V培养的细胞（P均<0.05）。 结论 OpTmizer培养基因其低血清依赖性、高扩增效率和扩增细胞良好的生物学功能，更适用于临床过继免疫治疗用γδT细胞的大量培养。
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  蛋白连接组织生长因子表达腺病毒的构建及其基因功能

  宫宁,章华兵,方福德,常永生

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 649-653. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.013

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  目的构建及鉴定蛋白连接组织生长因子（CTGF）基因过表达腺病毒，初步探究CTGF在糖脂代谢方面的功能。 方法 克隆CTGF过表达质粒，定向克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV，Pme I酶切线性化穿梭质粒转化改造的 E.coli BJ5183(含腺病毒载体pAdEasy-1)感受态细菌产生重组腺病毒载体，用Pac I线性化重组质粒，回收转染293A细胞包装病毒颗粒，经过3轮扩增，感染肝原代细胞，观察感染效率及检测基因表达情况。通过对小鼠不同时间段的饥饿处理，提取肝脏RNA做RT-PCR，实时定量PCR检测CTGF基因在不同营养条件下的变化情况。 结果 成功包装CTGF的腺病毒，感染效率达90%以上。CTGF在不同营养条件下表达情况不同，并且与糖脂代谢重要基因过氧化物酶体增值激活受体γ共激活因子1α表达情况一致。饥饿24h，CTGF上调（3.38±0.51）倍；饥饿48h，CTGF上调（5.26±1.25）倍(P<0.05)。 结论 初步认定CTGF可能参与糖脂代谢。
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  亚硒酸钠对结直肠癌HCT 116和SW480细胞中βcatenin及下游靶基因cyclin D1表达的影响

  罗慧,杨洋,许彩民

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 654-658. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.014

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  目的研究亚硒酸钠对结直肠癌HCT-116和SW480细胞中β-catenin及下游靶基因cyclin D1表达的影响。 方法 采用10μmol/L亚硒酸钠处理HCT-116和SW480细胞， Western blot及RT-PCR检测亚硒酸钠处理后不同时间HCT-116和SW480细胞中β-catenin和cyclin D1的表达情况，并观察蛋白酶体抑制剂MG132预处理后对 HCT-116和SW480细胞中β-catenin和cyclin D1表达的影响。采用免疫共沉淀方法检测亚硒酸钠对HCT-116和SW480细胞中β-catenin 与T细胞因子4（TCF4）相互作用的影响。 结果 亚硒酸钠可降低HCT-116和SW480细胞中β-catenin和cyclin D1的表达水平，用蛋白酶体抑制剂MG132预处理可增加亚硒酸钠处理后HCT-116和SW480细胞中β-catenin和cyclin D1的表达水平。免疫共沉淀实验结果显示，亚硒酸钠能破坏β-catenin与TCF4间的相互作用。 结论 亚硒酸钠可降低结直肠癌HCT-116和SW480细胞中β-catenin及cyclin D1的表达水平，蛋白酶体介导的降解途径可能在这一过程中发挥了重要作用。亚硒酸钠引起的β-catenin与TCF4相互作用减少可能对β-catenin靶基因的转录也起到了一定的调控作用。
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  βcatenin在内侧颞叶癫痫发病机制中的作用

  幸小亮,沙龙泽,张丹,沈岩,吴立文,许琪

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 659-662. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.015

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  目的探讨β-catenin与内侧颞叶癫痫发病机制之间的关系。 方法 以海人酸诱导建立内侧颞叶癫痫小鼠模型，采用Western blot检测正常鼠和模型鼠海马中β-catenin表达是否存在差异，免疫组织化学和免疫荧光技术检测非海马硬化内侧颞叶癫痫与海马硬化颞叶癫痫患者海马中β-catenin表达量是否存在差异。 结果 模型鼠海马硬化与内侧颞叶癫痫海马硬化相似，模型建立成功。Western blot检测结果显示，正常鼠与模型鼠海马的β-catenin表达无差异。免疫组织化学和免疫荧光检测结果发现，海马硬化患者的星型胶质细胞明显增多，β-catenin的表达量在非海马硬化颞叶癫痫和海马硬化颞叶癫痫患者间不存在差异。 结论 β-catenin可能未参与内侧颞叶癫痫海马硬化的形成过程。
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  受体型蛋白酪氨酸磷酸酶R基因多态性与重性抑郁障碍的关联分析

  石翠娟,张克让,许琪

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 663-669. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.016

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  目的探讨受体型蛋白酪氨酸磷酸酶R (PTPRR)基因多态性与重性抑郁障碍 (MDD)及其内表型的关联性。 方法 收集中国北方汉族MDD患者517例（MDD组）和健康志愿者455人（对照组），采用时间飞行质谱技术检测研究对象PTPRR基因的11个单核苷酸多态性 (SNPs)位点的多态性，采用UNPHASED软件进行等位基因、基因型、单倍型及数量性状分析。 结果 单位点分析显示，等位基因频率和基因型分布在MDD组和对照组间差异无统计学意义（校正后P>0.05）；单倍型分析显示，三位点单倍型rs1398599 (C )-rs2175711 (A )-rs4489789 (T )(P=0.0023，OR=1.334, 95%CI=1.104～1.612)和四位点单倍型rs11178391 (C )-rs1398599 (C )-rs2175711 (A )-rs4489789 (T )(P=0.0063, OR=1.281, 95%CI=1.059～1.549)均显著增加MDD发病风险；数量性状分析显示，SNP rs2203231的等位基因和基因型分别与 韦氏记忆量表 (WMS-R) 的心智原始分(P=0.0038，P=0.0024) 和心智量表分 (P=0.0057，P= 0.0038) 以及图片原始分(P=0.0027，P=0.0015)和图片量表分 (P=0.0035，P=0.002) 显著相关。 结论 PTPRR基因rs2203231多态性可能与MDD患者的长时记忆和短时记忆功能障碍相关联。
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  锰超氧化物岐化酶在大肠癌中的表达及临床病理相关性分析

  李晓,孙自勤,魏志,牛兢,刘晓峰,汪伟

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 670-674. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.017

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  目的探讨锰超氧化物岐化酶（MnSOD）在大肠癌组织中的表达及其临床病理学意义。 方法 采用免疫组织化学方法检测25例大肠癌、大肠腺瘤、癌旁组织中MnSOD表达及细胞定位，比较大肠癌、癌旁组织、大肠腺瘤中MnSOD的阳性率；RT-PCR方法检测20例大肠癌及癌旁组织，10例大肠腺瘤中MnSOD的水平，比较大肠癌、癌旁组织和大肠腺瘤中MnSOD mRNA相对表达量，分析大肠癌组织中MnSOD表达水平与各临床参数之间的关系。 结果 大肠癌癌组织、大肠腺瘤组织及癌旁正常大肠组织中MnSOD表达率分别为76%、44%及16%，大肠癌中MnSOD表达率显著高于癌旁正常大肠组织和大肠腺瘤组织（P均0.05）。 结论 MnSOD可能在大肠癌发生、发展中发挥作用，有望成为大肠癌潜在的生物标志物。
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  非病毒诱导体系高效诱导脐带来源间充质干细胞向胰岛细胞分化

  李晶,朱莉,赵春华

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 675-678. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.018

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  目的探讨非病毒法诱导脐带来源间充质干细胞(UC-MSC)向胰岛素分泌细胞分化的可行性，为胰岛细胞移植治疗糖尿病提供临床移植数量级的细胞。 方法 从人脐带分离间充质干细胞，体外分阶段诱导分化为胰岛细胞。采用RT-PCR方法比较胰岛细胞分化过程中转录因子foxa2、sox17、pdx1、ngn3、pax4、insulin和glut-2在诱导组和非诱导组中的表达水平；免疫荧光染色方法检测胰岛素和C-肽在诱导终末阶段细胞中的表达定位；酶联免疫吸附实验（ELISA)检测胰岛素及C-肽的分泌以及细胞对葡萄糖刺激的反应性。 结果 诱导第1阶段末，诱导后细胞foxa2和sox17的表达明显高于未诱导细胞 (P均＜0.05)；诱导第2阶段末，诱导细胞pdx1、ngn3和pax4的表达明显高于未诱导细胞 (P均＜0.05)；诱导第3阶段末，诱导细胞的insulin和glut-2表达明显高于未诱导细胞 (P均＜0.05)。免疫荧光染色结果显示，胰岛素和C-肽均表达于诱导终末分化阶段的细胞，效率可达90%以上。ELISA检测结果显示，诱导第3阶段末细胞胰岛素总量为(346.3-739±32.5-149)μU/ml，明显高于未诱导细胞的(17.69±1.46) μU/ml(P<0.01)；诱导后细胞置于5.5-mmol/L葡萄糖环境检测到的基础C-肽释放量为（195.10±8.88）pmol/L/h(P<0.01)，细胞置于22-mmol/L葡萄糖环境测定葡萄糖刺激C-肽释放量达到(340.99±7.91)pmol/L/h(P<0.01)。 结论 以UC-MSC作为种子细胞，采用体外非病毒诱导体系获得的分化终末阶段细胞是具有胰岛素分泌功能的成熟胰岛细胞。
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  促肾上腺皮质激素受体检测和肿瘤细胞超微结构观察在肾上腺皮质肿瘤亚型诊断中的应用价值

  樊华,李汉忠,严维刚,石冰冰

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 679-684. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.019

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  目的评估促肾上腺皮质激素受体（ACTH-R）检测和肿瘤细胞超微结构观察在肾上腺皮质肿瘤亚型诊断中的应用价值。 方法 采用Polymer免疫组织化学染色方法检测87例肾上腺皮质肿瘤组织中的ACTH-R表达情况，并以10例正常肾上腺组织作为对照；电子显微镜观察肿瘤细胞的超微结构，比较超微结构间的差异。 结果 sub-CPA组、CPA组、APA组、NFA组和NC组的ACTH-R阳性表达率分别为（80.1±8.2）%、（53.2±10.3）%、（63.2±10.1）%、（83.3±6.5）%和（70.1±7.3）%，其中，NFA组和sub-CPA组均明显高于NC组（P=0.001，P=0.000）、APA组（P=0.000，P=0.000）及CPA组（P=0.000，P=0.000），NC组明显高于APA组（P=0.039），APA组明显高于CPA组（P=0.037），NFA与sub-CPA组间差异无统计学意义（P=0.325）。透射电子显微镜观察结果显示，肾上腺皮质肿瘤具有部分相似的超微结构，但不同亚型肾上腺皮质肿瘤细胞内分泌颗粒的类型和数量存在差异。 结论 ACTH-R检测和肿瘤细胞超微结构观察可用于区分不同分泌功能的肾上腺皮质肿瘤。
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  初步建立中国人前列腺癌预测的数学模型

  李秋洋,唐杰,李岩密,费翔,张艳,何恩辉

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 685-688. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.020

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  目的建立中国人前列腺癌预测模型。 方法 对556例疑似前列腺癌患者行前列腺穿刺活检，收集建立模型的变量：患者年龄、前列腺体积、前列腺特异性抗原（PSA）、游离PSA（f-PSA）/总PSA（t-PSA）。将变量通过逐步回归建立回归方程，在此基础上建立穿刺活检阳性的危险评分数学模型，并通过受试者工作曲线下面积来评估该模型的预测价值。 结果 556例患者中，205例（36.87%）经前列腺穿刺活检证实为前列腺癌。单因素分析结果显示，患者的年龄、前列腺体积、血清PSA、f-PSA/t-PSA均为建立数学模型的影响因素。对受试者工作曲线的分析结果显示，所建模型的曲线下面积为0.8767，大于患者年龄、前列腺体积、PSA、f-PSA/t-PSA等单因素的0.6397、0.7255、0.7111、0.6973。 结论 初步建立具有较高预测价值的前列腺癌预测模型。
综述
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  细胞重编程：调节关键基因获得需要细胞

  庞希宁

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 689-695. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.021

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  细胞重编程是在一定条件下成体细胞的记忆被擦除，重新程序化产生新的表型和功能，导致细胞命运发生改变，主要发生在不涉及基因组DNA序列改变的基因表达水平，即通过改变细胞基因表达程序(时空和差异)，对其进行重新编程而改变细胞的分化方向，获得所需要的细胞。对于细胞重编程的深入研究有助于掌握机体细胞的发生发育机制，为解决再生医学种子细胞来源问题提供理论基础。人类未来将从许多分化的细胞获得更多所需要的另外一些分化细胞，这对细胞分化机制和疾病的细胞替代治疗研究具有划时代的意义，本文总结了细胞重编程的分类、影响因素、方法及最新进展。
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  神经系统疾病所致低钠血症相关的神经脱髓鞘综合征

  江怡,魏俊吉,王任直,任祖渊

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 696-700. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.022

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  低钠血症在神经系统疾病中较常见，神经系统疾病引起的低钠血症的诊断及治疗是临床医生争议颇多的问题。越来越多的临床研究表明，渗透性神经脱髓鞘综合征（ODS）与低钠血症密切关联。ODS常表现为脑桥中央髓鞘溶解症、脑桥外髓鞘溶解症或两者合并发生。本文讨论了神经系统疾病所致低钠血症患者发生ODS的临床表现、发病机制及影响因素，总结了ODS的治疗及预防策略。
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  脑动静脉畸形血管内栓塞的影响因素及治疗进展

  吴红星,李佑祥,杨小朋

  中国医学科学院学报. 2011, 33(6): 701-705. https://doi.org/10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.023

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  血管内栓塞治疗已成为治疗脑动静脉畸形(BAVM)的主要方法之一，随着微导管技术及栓塞材料不断完善，对BAVM的认识逐步提高，疗效也越来越好。本文总结了BAVM血管内栓塞的影响因素及治疗进展。