目的 探究YTH结构域家族蛋白2(YTHDF2)液-液相分离(LLPS)对亚砷酸钠诱导皮肤细胞恶性转化的影响,为亚砷酸钠致癌的防控提供新的干预靶点。方法 使用1 μmol/L亚砷酸钠连续处理22周构建YTHDF2蛋白正常发生LLPS(YTHDF2-wt)及抑制YTHDF2蛋白发生LLPS(YTHDF2-mut)的HaCaT恶性转化细胞模型。采用共聚焦显微镜观察并表征亚砷酸钠诱导皮肤细胞恶性转化过程中YTHDF2蛋白形成的LLPS液滴,并通过细胞增殖、划痕愈合及克隆形成实验检测细胞恶性表型。采用蛋白免疫印迹、定量逆转录PCR与免疫荧光实验检测YTHDF2蛋白LLPS在亚砷酸钠诱导皮肤细胞恶性转化中对第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)mRNA和蛋白表达的影响。结果 亚砷酸钠处理4周后,YTHDF2-wt细胞内出现YTHDF2蛋白LLPS液滴,且液滴数随着亚砷酸钠处理时间的延长逐渐增多(F=35.252,P<0.001),而YTHDF2-mut细胞没有观察到LLPS液滴。与YTHDF2-mut细胞比较,YTHDF2-wt细胞在亚砷酸钠处理22周时的增殖能力在48(t=3.654,P=0.006)、72 h(t=5.458,P<0.001)显著增高;YTHDF2-wt细胞在亚砷酸钠处理8、22周时的划痕愈合率显著增加(t=12.137,P<0.001;t=4.484,P=0.011);YTHDF2-wt细胞在亚砷酸钠处理4(t=3.365,P=0.027)、8(t=5.580,P=0.005)、22周(t=3.328,P=0.029)的克隆形成数显著增加。与YTHDF2-mut细胞比较,亚砷酸钠处理22周时,YTHDF2-wt细胞PTEN蛋白含量(t=-3.119,P=0.036)和mRNA翻译率(t=4.051,P=0.015)显著降低。免疫荧光结果显示,亚砷酸钠处理4周后,YTHDF2-wt细胞内YTHDF2蛋白LLPS液滴定位于翻译相关无膜细胞器的应激颗粒中。结论 在亚砷酸钠诱导皮肤细胞恶性转化中,YTHDF2蛋白发生LLPS,定位于翻译相关无膜细胞器应激颗粒中。YTHDF2蛋白LLPS通过抑制关键抑癌因子PTEN mRNA的翻译参与亚砷酸钠诱导皮肤细胞恶性转化。

目的 探讨SORT1在胃癌组织中的表达情况,分析其与患者临床预后的关系以及参与胃癌进展的途径及机制。方法 采用基因表达谱交互分析数据库、Western blot和免疫组织化学染色预测并分析SORT1在胃癌及癌旁组织中的表达情况。收集2015年4月至2017年4月蚌埠医科大学第一附属医院行胃癌根治术的109例患者的临床病例资料,分析SORT1与患者临床病理参数以及预后的关系。采用CCK-8法和克隆形成实验检测胃癌细胞的增殖情况,细胞划痕实验和Transwell实验检测胃癌细胞的迁移及侵袭能力,Western blot检测胃癌细胞上皮间质转化(EMT)过程中相关蛋白表达,并进一步分析SORT1调控胃癌细胞EMT的分子机制。结果 Western blot和免疫组织化学染色结果显示,SORT1在胃癌组织中呈高表达(P=0.003,P<0.001),且与肿瘤的恶性进展呈正相关(P均<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,SORT1高表达患者的术后生存期明显缩短(P<0.001);Cox回归模型显示,SORT1表达是影响胃癌患者术后5年生存率的独立危险因素(P<0.001)。上调SORT1表达显著促进胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭以及EMT过程(P均<0.05),而下调SORT1结果则相反(P均<0.05)。Western blot结果显示,高表达SORT1显著促进β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1及c-Myc的蛋白表达(P均<0.05),且体外使用Wnt/β-连环蛋白通路抑制剂(XAV939)能够明显抑制高表达SORT1导致的胃癌细胞EMT能力的增强(P均<0.05)。结论 SORT1在胃癌中高表达且影响患者术后生存期,其参与胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并可能通过激活Wnt/β-连环蛋白通路促进胃癌细胞EMT过程。

目的 应用生物信息学方法筛选急性心肌梗死(AMI)中差异双硫死亡相关基因(DRG),分析DRG在AMI中的分子模式并构建DRG相关预测模型。方法 从基因表达综合数据库下载AMI相关数据集,筛选AMI中差异表达DRG。采用CIBERSORT法分析免疫浸润情况。基于差异表达DRG对AMI患者进行一致性聚类分析并分型,基于分型结果进行免疫浸润分析、差异分析、基因本体、京都基因与基因组百科全书和基因集变异分析;随后进行加权基因共表达网络分析(WGCNA),构建亚型相关模块并筛选枢纽基因,最后基于枢纽基因构建最小绝对收缩和选择算子、随机森林和支持向量机递归特征消除模型筛选核心基因,构建DRG相关预测模型。通过绘制列线图和受试者工作特征曲线(ROC)评估预测模型的诊断效能,并进行外部验证。结果 从AMI患者和对照者间筛选出9个差异表达DRG,根据其表达水平将AMI患者分为C1和C2两个亚型。单核细胞、M0型巨噬细胞和中性粒细胞在AMI患者及C1亚型中浸润增多(P均<0.05),DRG与免疫细胞密切相关。DRG的C1和C2亚型间共鉴定出257个基因差异表达,且与骨髓白细胞活化和细胞因子的正向调节等生物过程相关,C1亚型中Fcγ受体介导的吞噬作用和NOD样受体信号通路活性增强。WGCNA分析显示棕色模块与DRG亚型最相关(r=0.67),从该模块中筛选出23个差异表达枢纽基因。3种机器学习方法筛选的特征基因取交集得到AQP9、F5和PYGL基因构成的DRG相关预测模型。列线图和ROC曲线(AUC_训练集=0.891,AUC_验证集=0.840)均显示出良好的临床诊断效能。结论 DRG与AMI发生发展密切相关,DRG相关预测模型(AQP9、F5和PYGL)可能为AMI的诊断和个性化治疗提供潜在靶点。

目的 探究组织激肽释放酶7(KLK7)小分子抑制剂C42对高表达KLK7卵巢癌的影响,并评估其作为卵巢癌新治疗策略的可行性。方法 采用CCK-8法、流式细胞术、细胞划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验以及Western blot检测方法,从细胞水平分析C42对高表达KLK7卵巢癌SKOV3细胞株的增殖、迁移和侵袭能力的影响;通过构建SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察C42对移植瘤生长和转移的影响,并采用免疫组织化学染色检测转移和侵袭相关蛋白的表达情况。结果 细胞实验显示,与对照组比较,C42能够显著抑制SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P均<0.001)。动物模型实验显示,与对照组比较,10.2 mg/kg C42干预后裸鼠肿瘤重量降低(P=0.009),且发生肝脏转移的数量减少。免疫组织化学染色结果显示,10.2 mg/kg C42组肿瘤组织中增殖指标Ki-67蛋白表达较对照组显著降低(P=0.002),肿瘤转移和侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶9(P=0.027)和Vimentin(P=0.039)表达水平显著降低。结论 KLK7小分子抑制剂C42能够有效抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

目的 分析老年人新型冠状病毒感染死亡的影响因素。方法 收集2023年1月1日至2023年7月8日华西第四医院因新型冠状病毒感染导致死亡的病例资料,并选取同期华西老年人群健康队列中感染新型冠状病毒后存活的病例作为对照,采用LASSO-Logistic回归对倾向性评分匹配后数据进行分析,并通过绘制受试者工作特征曲线对构建的预测模型进行验证。结果 共纳入142例新型冠状病毒感染死亡者和3 239名存活者。LASSO-Logistic回归分析结果显示,吸烟(OR=3.33,95%CI=1.46~7.59,P=0.004)、脑卒中(OR=3.55,95%CI=1.15~10.30,P=0.022)、恶性肿瘤(OR=19.93,95%CI=8.52~49.23,P<0.001)、冠心病(OR=7.68,95%CI=3.52~17.07,P<0.001)、发热(OR=0.51,95%CI=0.26~0.96,P=0.042)、气喘或呼吸困难(OR=21.48,95%CI=9.44~51.95,P<0.001)、呕吐(OR=8.19,95%CI=2.87~23.58,P<0.001)是新型冠状病毒感染患者死亡的独立危险因素。基于影响因素构建的预测模型在测试集中的曲线下面积为0.889。结论 吸烟、脑卒中、恶性肿瘤、冠心病、发热、气喘或呼吸困难以及呕吐是影响新型冠状病毒感染死亡风险的因素。

目的 探讨简短版蒙特利尔认知评估量表(MoCA)在社区≥50岁人群中判别认知障碍的信效度,并进行成本结果分析。方法 评估简短版MoCA的内部一致性和重测信度。以临床痴呆评定量表(CDR)为诊断标准,计算简短版MoCA判别轻度认知障碍(MCI)和痴呆的受试者工作特征曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度,采用Kappa检验和Bland-Altman法分析简短版MoCA和完整版MoCA判别结果的一致性,并估算和比较两版本需额外评估人数和总体评估时间。结果 共纳入303名研究参与者,包括192名无认知障碍者,94例MCI患者和17例痴呆患者。简短版MoCA的Cronbach α系数为0.754,重测系数为0.711(P<0.001);判别MCI的AUC为0.889,敏感度和特异度分别为74.5%和93.8%;判别痴呆的AUC为0.994,敏感度和特异度分别为100%和93.8%。采用简短版MoCA在303名参与者中识别出94例MCI,107例需额外进行诊断评估,总体评估时间为142.4 h,评估人数和时间成本与完整版MoCA相比下降了21.3%和32.7%;采用简短版MoCA在303名参与者中识别出17例痴呆,35例需额外进行诊断评估,总体评估时间为70.4 h,时间成本与完整版MoCA相比下降了29.5%。结论 简短版MoCA在社区中老年人群中能够较好地识别认知障碍患者,诊断效力与完整版MoCA相当,但识别真阳性病例所耗费的时间成本更低,且需额外评估的人数更少,可以在社区初筛环境中推广使用。

目的 分析继发性甲状腺鳞状细胞癌(SSCC-T)的超声图像特征,探讨超声对SSCC-T的诊断价值。方法 回顾性分析2016年1月至2025年1月首都医科大学附属北京友谊医院收治的12例经病理证实的SSCC-T患者的临床及超声资料,包括病灶大小、回声、边缘、血流、钙化及颈部淋巴结转移情况。采用描述性统计分析SSCC-T的超声图像特征,Fisher精确检验分析不同超声分型与甲状腺功能异常的相关性。结果 12例患者中,结节型6例(50.0%),弥漫型4例(33.3%),混合型2例(16.7%)。弥漫型病例均呈现特征性条索样低回声。所有病例均伴颈部淋巴结转移,其中9例(75.0%)淋巴结最大径>2 cm。甲状腺功能异常者8例(66.7%),2例出现甲状腺功能亢进-甲状腺功能减退动态变化。弥漫型与混合型更易导致甲状腺功能减退(P=0.038)。结论 SSCC-T的超声图像具有一定特征,尤其是弥漫型SSCC-T具有条索样表现。对鳞状细胞癌患者定期进行甲状腺及颈部淋巴结的超声检查并结合甲状腺功能变化,有利于及时发现鳞状细胞癌甲状腺转移。