2004年, 第26卷, 第5期　刊出日期：2004-10-20

  

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论著摘要
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  人白介素-1受体拮抗剂、人白介素-10基因治疗载体构建与鉴定

  韩飞;张宁;唐福林

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 482-482.

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论著
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  钠升电喷雾串联质谱技术鉴定两种髓系白血病细胞分化相关蛋白质

  夏晴;王红霞;王杰;刘炳玉;胡美茹;张学敏;沈倍奋

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 483-487.

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  目的 鉴定IL-6诱导小鼠髓系白血病Ｍ１细胞分化过程中出现的两种上调表达的相关蛋白质。方法 将待鉴定的蛋白质斑点从双向电泳凝胶上切下，经胶内胰蛋白酶酶切后，先进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）肽质量指纹谱分析，再通过钠升电喷雾串联质谱（Nano-ESI-MS/MS）技术获得其胰蛋白酶水解肽段的串联质谱图和肽段的全长序列，串联质谱图经Micromass专用软件MaxEnt3处理后，通过Mascot查询NCB I、SWISSPROT等数据库。结果 两种未能通过肽质量指纹谱鉴定
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  BAY11-7082及Lactacystein在CD154诱导转录因子NF-κB活化中的作用

  张烜;张文;曾小峰;张奉春;唐福林;于孟学

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 488-491.

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  目的 对IκB-α磷酸化抑制剂BAY11-7082及蛋白酶小体抑制剂Lactacystein 在CD154诱导转录因子NF-κB活化中的作用机制进行研究。方法 应用重组CD154刺激EBV/LMP1阴性Ramos B细胞，并分别加入BAY11-7082及Lactacystein，比较其对CD154诱导NF-κB luciferase活化、IκB-α磷酸化和降解、p65磷酸化以及NF-κB亚单位进入细胞核等各环节的抑制作用。结果 Ramos细胞中BAY11-7082及Lactacystein均可完全抑制
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  PD153035对人多发性骨髓瘤细胞XG-1的诱导凋亡作用及机制

  何晓燕;黄建安;谢玮;蒋令瑜;王月丹

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 492-495.

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  目的 研究表皮生长因子受体(EGFR)在多发性骨髓瘤细胞增殖与生存中的作用及机制。方法 采用EGFR抑制剂PD153035对多发性骨髓瘤细胞XG-1上的EGFR进行阻断。采用3H掺入法、MTT法和Annexin V染色检测细胞的增殖与凋亡情况，同时采用Western blot方法分析PD153035对STAT3磷酸化的影响。结果 PD153035可以使XG-1细胞增殖能力下降，并诱导XG-1细胞凋亡。而且PD153035还可以阻断HB-EGF诱导的STAT3的磷酸化，但对IL-6诱导的STAT3的磷酸
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  抗人趋化素样因子1羧基端多肽抗体的制备、鉴定及组织芯片分析

  石爽;张颖妹;邱晓彦;朱晓辉;刘雅楠;甘启霓;杨田;宋泉声;马大龙;韩文玲

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 496-499.

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  目的 制备及鉴定抗人趋化素样因子1（CKLF1）多克隆抗体，为CKLF1表达和功能研究提供基础。方法 利用生物信息学方法分析CKLF1蛋白序列，设计、合成CKLF1羧基端多肽，与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联，免疫新西兰白兔获得多克隆抗体。经ELISA法测定抗体效价，Western blot鉴定抗体与原核细胞体外翻译和果蝇S2细胞稳定转染表达的CKLF1反应，组织芯片检测该抗体与内源性表达的CKLFs结合。结果 抗CKLF1Ｃ端多肽抗体的效价为10-4，能识别在原核细胞体外翻译系统和真核细胞中表达的CKL
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  原发性胆汁性肝硬化患者中自身抗原丙酮酸脱氢酶特异性CD8+CTL表位预测及鉴定

  刘海英;姚定康;屠小卿;周晔;朱烨;陈燕;范列英;仲人前

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 500-504.

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  目的 鉴定原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者中自身抗原丙酮酸脱氢酶（PDC-E2）上的HLA-A*0201限制性CD8+ CTL表位，为临床探索特异性免疫治疗奠定基础。方法 应用数据库SYFPEITHI预测PDC-E2上两段涵盖Ｂ细胞表位和CD4+T细胞表位的氨基酸序列（163～184aa和36～49aa）附近可能存在的HLA-A*0201限制性T细胞表位，再通过T2细胞株、细胞增殖试验和细胞毒性检测分别分析各抗原肽与HLA-A*0201的结合力、诱导患者外周血单个核细胞（PBMCs）增殖能力及抗原肽诱导
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  细胞因子基因多态性与中国人原发性胆汁性肝硬化的相关性

  范列英;朱烨;仲人前;屠小卿;叶伟民;陈曲波;曾万杰;孔宪涛

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 505-509.

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  目的 探讨IL-1、IL-6、IL-10基因多态性与中国人原发性胆汁性肝硬化（PBC）发病的相关性。方法 采用限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）和序列特异性PCR（SSP）法，分析77例PBC患者及160例健康对照者外周血单核细胞基因组DNA IL-1（+3953）、IL-1受体拮抗剂（IL-1 RN）、IL-6启动子（-174）、IL-10启动子（-592、-819、-1082）基因多态性，并进行对比分析。结果 PBC组IL-1 RN 1,1等位基因携带率明显高于对照组（90.9% vs
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  免疫复合物对U937细胞和中性粒细胞表面Fc受体表达的调节

  郭丽华;张伟

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 510-514.

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  目的 探讨免疫复合物（ICs）对U937细胞和中性粒细胞表面Fc受体表达的调节。方法 将U937细胞或中性粒细胞与各种免疫复合物共同孵育1h后，用流式细胞仪分析细胞表面各种Fc受体的表达情况。结果 IgG1 ICs和IgG3 ICs能上调U937细胞表面FcγRⅡ和FcγRⅢ以及中性粒细胞表面的FcγRⅠ和FcαRⅠ的表达。与各类免疫复合物孵育后中性粒细胞表面FcγRⅡ的表达呈降低趋势。结论 免疫复合物能调节中性粒细胞和U937细胞Fc受体的表达，其中以IgG1 ICs和IgG3 ICs最为明显。
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  恶性疟原虫类巨噬细胞迁移抑制因子基因的克隆和表达

  韩志富;邵丁丁;王恒

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 515-518.

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  目的 克隆、表达恶性疟原虫的巨噬细胞迁移抑制因子（MIF）同源基因Pfmif。方法 参照人MIF基因（Humif）氨基酸序列在P.falciparumｉｐａｒｕｍ基因组中找到同源核苷酸序列，设计特异引物，采用RT-PCR方法从恶性疟原虫3D7株红内期RNA扩增获得Pfmif基因；利用生物信息学软件分析所扩增的基因；原核表达重组PfMIF蛋白，并亲和纯化。结果 从恶性疟原虫RNA中扩增到Pfmif基因，长度为351bp，编码116个氨基酸，具有MIF家族蛋白的典型特征。成功的表达及纯化了融合有GST标签
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  一氧化氮对肝癌细胞线粒体膜通透性和胞浆中细胞色素C含量的影响

  蒋雪梅;郑大利;林建银

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 519-523.

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  目的 探讨一氧化氮（NO）对肝癌细胞线粒体膜通透性和胞浆中细胞色素C(cyt C)含量的影响。方法 用NO供体硝普钠（SNP）诱导SMMC-7721和HepG2肝癌细胞株凋亡流式细胞术检测SMMC-7721和HepG2细胞凋亡率，MTT法观察肝癌细胞生长增殖情况 流式细胞术检测细胞线粒体跨膜电位变化，Western blot检测胞浆中cyt C含量的变化,时应用线粒体膜通透性转变孔开放抑制剂CsA和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶抑制剂BSO预处理细胞，并观察以上各指标的变化。结果 SNP能诱导人肝癌细胞
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  化疗药物增强重组可溶性TRAIL抗肿瘤作用

  王明婕;刘彦信;李晓玲;史娟;刘士廉;郑德先

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 524-528.

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  目的 探讨化疗药物对重组可溶性TRAIL(rsTRAIL)抗肿瘤作用的影响及其分子机制。方法 13株不同肿瘤细胞经TRAIL处理后，采用MTS-PMS染色法和流式细胞仪技术测定细胞凋亡率，观察肿瘤细胞对TRAIL的敏感性；化疗药物与TRAIL联合作用于敏感性不同的肿瘤细胞检测细胞敏感性的变化；免疫印迹技术分析TRAIL受体DR5蛋白表达。结果 13株肿瘤细胞中约46.2%(6/13)的细胞株对TRAIL敏感；化疗药物CHX、CP和8-CA可显著提高肿瘤细胞株对TRAIL细胞毒作用的敏感性；8-CA和T
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  人胎脑中hSNF5结合蛋白的筛选、克隆及分析

  张怡;杨珺;吴宁华;沈珝琲

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 529-532.

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  目的 寻找在神经细胞中与染色质重塑复合物中hSNF5亚单位相结合的靶蛋白并探索其功能，为阐明hSNF5在细胞中参与染色质重塑复合物对靶基因调控的机制提供线索。方法 以hSNF5为诱饵，采用酵母双杂交系统筛选人胎脑MATCHMAKE cDNA文库。测定核苷酸序列，计算机软件分析核苷酸的同源性及功能结构域。结果 获得9个阳性克隆。DNA序列分析及同源性比较表明，1个克隆的序列与推导蛋白FLJ20643羧基端的m RNA同源性高达97%，4个克隆与GenBank中可编码蛋白的序列有较高的同源性，其他４个克隆
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  hsp90α基因在染色质模板上的热诱导转录△

  李兆勇;代辉;杨珺;张业;吴宁华;沈珝琲

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 533-536.

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  目的 在体外将带有hsp90α基因启动子的报告基因质粒pBLCAT3α1组装为染色质模板，用于研究hsp90α基因的热诱导转录。方法 采用竞争性RT-PCR定量检测基因启动子活性的方法，研究染色质模板的体外组装，并比较染色质模板与裸露DNAＤＮＡ模板上基因的转录活性。结果 优化了热休克处理的HeLa全细胞抽提物在基因转录活性研究中的实验条件：用体外重组表达的染色质组装相关因子与核心组蛋白在体外与hsp90α基因启动子质粒组装成染色质；证明染色质模板的hsp90α基因体外转录水平低于裸露ＤＮＡ模板，而其
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  中国3个民族群体Y染色体上17个双等位基因位点的遗传分析

  俞建昆;孙浩;史磊;钱亚屏;史荔;黄小琴;褚嘉祐

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 537-542.

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  目的 研究中国不同民族群体Ｙ染色体的遗传多样性。方法 采用PCR和等位基因特定PCR(ASPCR)的方法，对山东汉族、白族和土族共计76份男性DNA样本进行Y染色体上17个双等位基因位点的基因分型，确定每一个体的单倍型，统计3个群体各单倍型的频率分布，与国内其他群体的结果进行对比分析，并进行这些群体的主成分分析。结果 有6个位点在3个群体中没有发现多态变异，YAP+在土族、白族和山东汉族中的分布分别为23.8%、6.7%和4%；3个群体共发现11种单倍型，山东汉族7种，土族8种，白族9种，主要单倍型频
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  BLTR-4永生化细胞系的建立及生物学特性初步鉴定

  郑闪;郭素萍;何祖根;程书钧;高燕宁

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 543-548.

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  目的 建立膀胱尿路上皮永生化细胞系，并初步鉴定其生物学特性。 方法 以Fugene-6TM为载体，将含人乳头瘤病毒16（HPV-16)、E7基因的HPV-16K质粒，体外转染原代培养的正常胎儿膀胱尿路上皮细胞。运用PCR、免疫组织化学及细胞特征鉴定等方法，对所得BLTR-4细胞系中HPV-16 E6、E7基因的存在情况及该细胞系生物学特性进行初步鉴定。结果 BLTR-4细胞系是含有HPV-16 E6、E7基因并表达上述两种蛋白质的尿路上皮源性细胞系。该细胞在体外已传70余代，细胞倍体数发生了二倍体至
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  延安地区汉族人群15个STR基因座多态性分析

  王振原;王芳;余荣军;李涛;贺光社;方俊邦

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 549-553.

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  目的 调查15个STR基因座在延安地区汉族人群中的多态性分布，为群体学研究、法医学个体识别和亲权鉴定提供基础数据。方法 应用美国ABI公司Identifiler荧光标记复合扩增试剂盒，结合PE9700扩增仪和ABI3100Avant遗传分析仪，对延安地区100名汉族无关个体的静脉血进行PCR扩增和电泳检测，并利用Genescan和Genotype软件进行自动分型。结果 15个STR基因座在延安汉族人群中的等位基因频率分布在0.005～0.550之间，基因型频率分布在0.010～0.310之间，累计耦合
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  突变型与野生型HPV16DNA疫苗的免疫原性

  左亚刚;王家璧;晋红中;刘跃华

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 554-557.

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  目的 评价突变人乳头瘤病毒16（HPV16 ）E7锌指结合区后HPV16 E7 DNA疫苗的免疫原性。方法 将构建的野生型pcDNA3.1/16E7和突变型pcDNA3.1/16ME7 DNA疫苗经肌肉免疫C57BL/6小鼠，分离脾单个核细胞，用E7特异性多肽刺激后，测定E7特异性白介素-2（IL-2）和干扰素-γ（IFN-γ）的水平及细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应。同时以未加E7多肽组作对照组。结果 经E7特异性多肽刺激后，cDNA3.1/16ME7 产生IL-2的斑点数明显高于pcDNA3.1/1
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  人乳头瘤病毒DNA载量与尖锐湿疣复发的相关性

  车雅敏;王家璧;左亚刚;刘跃华

  中国医学科学院学报. 2004, 26(5): 558-561.

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  目的 探讨人乳头瘤病毒（HPV）DNA载量与尖锐湿疣（CA）复发的关系。方法 采用实时荧光定量PCR技术，对31例初发性和31例复发性CA患者的疣体组织进行HPV6/11和HPV16/18 DNA的定量检测。结果 63例CA中，62例HPV6/11DNA阳性，阳性率98.4%。初发性CA HPV6/11DNA载量为1.4×103～6.7×107copies/ml，平均（8.4×106± 1.7×107）copies/ml；复发性CA HPV6/11DNA载量为1.2×104～3.6×108copies/