邱笑违, 王 雯, 蒋东桥, 王红霞, 闫 丽, 王晓燕, 马立权, 芦玲巧, 唐朝枢, 张立克
中国医学科学院学报. 2006, 28(6): 803-807.
摘要:目的 通过观察11,12-环氧二十碳三烯酸(11,12-EET)对缺氧/复氧人脐静脉内皮细胞损伤程度的影响, 了解EET血管保护的可能途径, 并初步探讨其作用机制。方法 采用原代培养人脐静脉内皮细胞, 随机分为对照组、缺氧/复氧组、11, 12-EET对照组、11, 12-EET缺氧/复氧组、细胞外信号调节的蛋白激酶(ERK1/2)抑制组和一氧化氮合酶抑制组。通过向培养瓶内通入混合气体(2%O2, 5%CO2, 93%N2)3h, 复氧1h复制缺氧/复氧损伤模型。采用MTT法检测细胞存活率, 比色法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的变化, Western blot方法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和ERK1/2的表达。结果 11,12-EET在常氧条件下可对细胞造成轻度损伤, 而在缺氧/复氧条件下能显著提高内皮细胞的存活率, 降低LDH的漏出率, 提高SOD的活性, 降低MDA的含量, 并且促进eNOS、磷酸化ERK1/2的表达。结论 11, 12-EET具有拮抗内皮细胞缺氧/复氧损伤作用, 这与其提高缺氧/复氧内皮细胞SOD活性、清除氧自由基、减少缺氧/复氧对eNOS及磷酸化ERK1/2表达的抑制有关。